醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)——執(zhí)業(yè)藥師考試輔導(dǎo)系列談之《中藥化學(xué)》輔導(dǎo)：中藥有效成分的分離與精制
（一）根據(jù)物質(zhì)溶解度差別進(jìn)行分離
（1）結(jié)晶及重結(jié)晶方法
判斷結(jié)晶純度的方法有：
a.晶型均一，色澤均勻醫(yī)。學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)。
b.有一定的熔點(diǎn)和較小的溶距，熔距應(yīng)在2℃以內(nèi)。
c.TLC或PC分別用三種以上溶劑系統(tǒng)檢識(shí)，呈現(xiàn)單一圓整斑點(diǎn)。
d.HPLC或GC檢查呈現(xiàn)單峰。
（2）沉淀法
水提醇沉法（除去多糖或蛋白質(zhì)）
醇提水沉法（除去樹(shù)脂或葉綠素）
醇提乙醚沉淀或丙酮沉淀法（使皂甙沉淀析出）
（3）pH法
酸提堿沉法（使生物堿類成分沉淀）
堿提酸沉法（使黃酮、蒽醌等成分沉淀）
等電點(diǎn)法（使蛋白質(zhì)沉淀）
（4）鹽類沉淀法：
（二）根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行分離
1.液-液萃取與分配系數(shù)K值
2.分離難易與分離因子β
3.分配比與pH醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)
4.紙色譜
5.分配柱色譜
（三）根據(jù)物質(zhì)的吸附性差別進(jìn)行分離
1.物理吸附基本規(guī)律—相似者易于吸附
（1）對(duì)極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和能力。故極性強(qiáng)的溶質(zhì)將被優(yōu)先吸附。
（2）溶劑極性越弱，則吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附能力越強(qiáng)。溶劑極性增強(qiáng)，則吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附能力減弱。
（3）溶質(zhì)即使被硅膠、氧化鋁吸附，但加入極性較強(qiáng)的溶劑時(shí)，又可被后者置換洗脫出來(lái)。
活性炭因?yàn)槭欠菢O性吸附劑，故與硅膠、氧化鋁相反。
2.極性及其強(qiáng)弱判斷
（1）官能團(tuán)的極性強(qiáng)弱按下列表達(dá)順序排列：
RCOOH ＞ Ar-OH ＞＞、RNHR ＞ RC=O ＞ R-O-R ＞ RH（2）化合物的極性由分子中所含官能團(tuán)決定。
3.吸附色譜法應(yīng)用
（1）硅膠、氧化鋁吸附柱色譜過(guò)程中，吸附劑的用量一般為樣品量的30-60倍。樣品極性較小、醫(yī)學(xué)教、育網(wǎng)原創(chuàng)難以分離者，吸附劑用量可適當(dāng)提高至樣品量的100-200倍。
（2）硅膠、氧化鋁吸附柱色譜，應(yīng)盡可能選用極性小的溶劑裝柱和溶解樣品，以利于樣品在吸附劑柱上形成狹窄的原始譜帶。
（3）洗脫所用溶劑的極性宜逐步增加。
（4）為避免發(fā)生化學(xué)吸附，酸性物質(zhì)宜用硅膠，堿性物質(zhì)則宜用氧化鋁進(jìn)行分離。
4.聚酰胺吸附色譜法
（1）聚酰胺的性質(zhì)及吸附原理
① 形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目越多，吸附能力越強(qiáng)。
② 成鍵位置對(duì)吸附力也有影響。易形成分于內(nèi)氫鍵者，其在聚酰胺上的吸附相對(duì)減弱。
③ 分子中芳香化程度高者，醫(yī)學(xué) 教育網(wǎng)原創(chuàng)則吸附性增強(qiáng)；反之，則減弱。
一般情況下，各種溶劑在聚酸胺柱上的洗脫能力由弱至強(qiáng)，可大致排列成下列順序；水→甲醇→丙酮→氫氧化鈉水溶液→甲酰胺→二甲基甲酰胺→尿素水溶液
（2）聚酰胺色譜的應(yīng)用
5.大孔吸附樹(shù)脂
（1）大孔吸附樹(shù)脂的吸附原理
大孔吸附樹(shù)脂是吸附性和分子篩性原理相結(jié)合的分子材料。吸附性是由于范德華引力或產(chǎn)生氫鍵的結(jié)果，分子篩性是由于其本身多孔性結(jié)構(gòu)所決定的。
（2）影響吸附的因素
大孔吸附樹(shù)脂本身的性質(zhì)、溶劑的性質(zhì)和化合物的性質(zhì)是影響吸附的3個(gè)重要因素。
（3）大孔吸附樹(shù)脂的應(yīng)用
苷與糖類的分離，生物堿的精制，多糖、黃酮、三萜類化合物的分離。
（4）洗脫液的選擇
洗脫液可使用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。
（四）根據(jù)物質(zhì)分子大小進(jìn)行分離
物質(zhì)分子大小不同的化合物可用透析法、凝膠過(guò)濾法、超濾法、超速離心法等分離。
1.凝膠過(guò)濾法醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)
凝膠的種類：常用的有葡聚糖凝膠（Sepadex-G）以及羥丙基葡聚糖凝膠（Sephadex-LH-20）。
2.膜過(guò)濾法
膜過(guò)濾法主要包括滲透、反滲透、超濾、電滲析、透析、液膜技術(shù)等。透析法多用于水溶性的大分子和小分子物質(zhì)的分離，如蛋白質(zhì)、酶、多糖分離過(guò)程中的脫鹽。醫(yī)學(xué)教育，網(wǎng)原創(chuàng)按照孔徑大小，可將透析膜分為：微濾膜、超濾膜、反滲透膜、納米膜。
（五）根據(jù)物質(zhì)解離程度不同進(jìn)行分離
離子交換樹(shù)脂的種類：陽(yáng)離子（強(qiáng)酸型和弱酸型）交換樹(shù)脂和陰離子（強(qiáng)堿型和弱堿型）交換樹(shù)脂。
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（一）根據(jù)物質(zhì)溶解度差別進(jìn)行分離
（1）結(jié)晶及重結(jié)晶方法
判斷結(jié)晶純度的方法有：
a.晶型均一，色澤均勻醫(yī)。學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)。
b.有一定的熔點(diǎn)和較小的溶距，熔距應(yīng)在2℃以內(nèi)。
c.TLC或PC分別用三種以上溶劑系統(tǒng)檢識(shí)，呈現(xiàn)單一圓整斑點(diǎn)。
d.HPLC或GC檢查呈現(xiàn)單峰。
（2）沉淀法
水提醇沉法（除去多糖或蛋白質(zhì)）
醇提水沉法（除去樹(shù)脂或葉綠素）
醇提乙醚沉淀或丙酮沉淀法（使皂甙沉淀析出）
（3）pH法
酸提堿沉法（使生物堿類成分沉淀）
堿提酸沉法（使黃酮、蒽醌等成分沉淀）
等電點(diǎn)法（使蛋白質(zhì)沉淀）
（4）鹽類沉淀法：
（二）根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行分離
1.液-液萃取與分配系數(shù)K值
2.分離難易與分離因子β
3.分配比與pH醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)
4.紙色譜
5.分配柱色譜
（三）根據(jù)物質(zhì)的吸附性差別進(jìn)行分離
1.物理吸附基本規(guī)律—相似者易于吸附
（1）對(duì)極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和能力。故極性強(qiáng)的溶質(zhì)將被優(yōu)先吸附。
（2）溶劑極性越弱，則吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附能力越強(qiáng)。溶劑極性增強(qiáng)，則吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附能力減弱。
（3）溶質(zhì)即使被硅膠、氧化鋁吸附，但加入極性較強(qiáng)的溶劑時(shí)，又可被后者置換洗脫出來(lái)。
活性炭因?yàn)槭欠菢O性吸附劑，故與硅膠、氧化鋁相反。
2.極性及其強(qiáng)弱判斷
（1）官能團(tuán)的極性強(qiáng)弱按下列表達(dá)順序排列：
RCOOH ＞ Ar-OH ＞＞、RNHR ＞ RC=O ＞ R-O-R ＞ RH（2）化合物的極性由分子中所含官能團(tuán)決定。
3.吸附色譜法應(yīng)用
（1）硅膠、氧化鋁吸附柱色譜過(guò)程中，吸附劑的用量一般為樣品量的30-60倍。樣品極性較小、醫(yī)學(xué)教、育網(wǎng)原創(chuàng)難以分離者，吸附劑用量可適當(dāng)提高至樣品量的100-200倍。
（2）硅膠、氧化鋁吸附柱色譜，應(yīng)盡可能選用極性小的溶劑裝柱和溶解樣品，以利于樣品在吸附劑柱上形成狹窄的原始譜帶。
（3）洗脫所用溶劑的極性宜逐步增加。
（4）為避免發(fā)生化學(xué)吸附，酸性物質(zhì)宜用硅膠，堿性物質(zhì)則宜用氧化鋁進(jìn)行分離。
4.聚酰胺吸附色譜法
（1）聚酰胺的性質(zhì)及吸附原理
① 形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目越多，吸附能力越強(qiáng)。
② 成鍵位置對(duì)吸附力也有影響。易形成分于內(nèi)氫鍵者，其在聚酰胺上的吸附相對(duì)減弱。
③ 分子中芳香化程度高者，醫(yī)學(xué) 教育網(wǎng)原創(chuàng)則吸附性增強(qiáng)；反之，則減弱。
一般情況下，各種溶劑在聚酸胺柱上的洗脫能力由弱至強(qiáng)，可大致排列成下列順序；水→甲醇→丙酮→氫氧化鈉水溶液→甲酰胺→二甲基甲酰胺→尿素水溶液
（2）聚酰胺色譜的應(yīng)用
5.大孔吸附樹(shù)脂
（1）大孔吸附樹(shù)脂的吸附原理
大孔吸附樹(shù)脂是吸附性和分子篩性原理相結(jié)合的分子材料。吸附性是由于范德華引力或產(chǎn)生氫鍵的結(jié)果，分子篩性是由于其本身多孔性結(jié)構(gòu)所決定的。
（2）影響吸附的因素
大孔吸附樹(shù)脂本身的性質(zhì)、溶劑的性質(zhì)和化合物的性質(zhì)是影響吸附的3個(gè)重要因素。
（3）大孔吸附樹(shù)脂的應(yīng)用
苷與糖類的分離，生物堿的精制，多糖、黃酮、三萜類化合物的分離。
（4）洗脫液的選擇
洗脫液可使用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。
（四）根據(jù)物質(zhì)分子大小進(jìn)行分離
物質(zhì)分子大小不同的化合物可用透析法、凝膠過(guò)濾法、超濾法、超速離心法等分離。
1.凝膠過(guò)濾法醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)
凝膠的種類：常用的有葡聚糖凝膠（Sepadex-G）以及羥丙基葡聚糖凝膠（Sephadex-LH-20）。
2.膜過(guò)濾法
膜過(guò)濾法主要包括滲透、反滲透、超濾、電滲析、透析、液膜技術(shù)等。透析法多用于水溶性的大分子和小分子物質(zhì)的分離，如蛋白質(zhì)、酶、多糖分離過(guò)程中的脫鹽。醫(yī)學(xué)教育，網(wǎng)原創(chuàng)按照孔徑大小，可將透析膜分為：微濾膜、超濾膜、反滲透膜、納米膜。
（五）根據(jù)物質(zhì)解離程度不同進(jìn)行分離
離子交換樹(shù)脂的種類：陽(yáng)離子（強(qiáng)酸型和弱酸型）交換樹(shù)脂和陰離子（強(qiáng)堿型和弱堿型）交換樹(shù)脂。
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