執(zhí)業(yè)中藥師藥劑學輔導:檢查熱原的方法

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1.家兔發(fā)熱試驗
    將一定量的供試品,靜脈注入家兔體內,在規(guī)定時間內,觀察家兔體溫升高的情況,以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定的方法。具體工作、環(huán)境、家兔的條件及操作方法,應嚴格按《中國藥典》1995年版熱原檢查項下規(guī)定執(zhí)行。
    2.鱟試驗法
    本法利用一種低溫海洋動物-鱟的血細胞(變形細胞)溶解物(又稱鱟試劑)與微量細菌內毒素或熱原發(fā)生凝膠反應,從而檢測微量的內毒素或熱原的一種實驗技術。該法實質上是一種酶反應,因為鱟血細胞中含有一種高分子量的凝固酶原和一種可凝固蛋白原,前者經內毒素(即熱原)激活轉化成具有活性的凝固酶,通過酶解作用,使凝固蛋白原轉變成凝固蛋白,凝固蛋白又經過交聯(lián)酶的作用相互聚合形成凝膠。
    膠凝的速度與內毒素濃度成正比。已知反應的最適溫度為36℃~38℃,最適pH值為6~7.5.
    本法雖具有操作簡便、迅速、靈敏度高(比兔法高10倍左右)等優(yōu)點,但若操作不當,會出現(xiàn)一定數(shù)量的假陽性反應,且尚未法定,一般多作預測和篩選試驗之用,對革蘭陰性桿菌以外的內毒素不敏感。