2012年公共營養(yǎng)師考試輔導(dǎo):防腐劑的測定5

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公共營養(yǎng)師考試山梨酸及其鹽的測定
    測定方法:
    (1) 比色法(硫代巴比妥酸比色法)
    (2) 紫外分光光度法
    (3) 薄層層析法
    (4) 氣相色譜法
    (5) 高壓液相色譜法
    (一)硫代巴比妥酸比色法
    1、原理
    樣品中的山梨酸在酸性溶液中,用水蒸汽蒸餾出來,然后用K2Cr2O7氧化成丙二醛和其它產(chǎn)物,丙二醛與硫代巴比妥酸反應(yīng),生成紅色物質(zhì),顏色的深淺與山梨酸含量成正比。(530nm下測定) 。
    2、操作方法
    ⑴ 樣品制備
    稱取100g左右的樣品→加蒸餾水250ml→在高速搗碎機(jī)上打漿→定容500ml→過濾→收集濾液
    ⑵ 山梨酸的提取
    準(zhǔn)確吸取兩份濾液各20ml→分別放入兩個(gè)250ml蒸餾瓶中→一個(gè)瓶加1ml磷酸、無水硫酸鈉20g、水70ml、玻璃珠3?!硪黄考?N NaOH5ml、無水硫酸鈉20g、水70ml、玻璃珠3?!麴s→分別用裝有10ml0.1N NaOH的100ml容量瓶接收餾液→當(dāng)餾液收集到80ml停止蒸餾,用少量水洗滌冷凝管→定容→分別吸10ml溶液→分別置于兩個(gè)100ml容量瓶→用0.01N NaOH定容→供樣液、空白測定用。
    ⑶ 測定
    準(zhǔn)確吸樣液、空白液2ml→于25ml比色管中→加水3ml→加2ml(K2Cr2O7+硫酸)混合液→在100℃水浴5分鐘→加0.5%硫代巴比妥酸2ml→沸水浴加熱7分鐘→冷卻→定容→于1cm比色杯在530nm處比色。
    ⑷ 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制